胚胎的冷冻保存

（1）胚胎放入冷冻玻璃瓶或管子内。

（2）胚胎从+23℃开始，以2℃/min的速率冷却到-6℃。

（3）种植并在-6℃保持10min。

（4）胚胎以0.1℃/min速率冷却到-80℃。

（5）投入液氮内。

（6）在室温（+23℃）下加入dmso，每隔10min增加浓度0.25mol/l，直到1.5mol/l。

用dmso冷冻保存卵裂胚胎而获临床妊娠的报道发表不久，cohen等报道应用冷冻/融解人类囊胚获得活产婴儿。该报道称体外受精获得的胚胎，受精后在人工环境内可放置4～7d。如囊胚继续发育，则将胚胎放进earl液中，在室温下加入甘油，经过6个不同的步骤，使甘油最后的浓度达到8%～10%。然后将胚胎放进试管内，从室温开始以1℃/min速率降到-7℃，进行手工种植。此后以0.3℃/min速率将试管冷却到-36℃，然后投入液氮中。

二、囊胚冷冻保存步骤