闭经只是一种症状，诊断时首先必须寻找引起闭经的原因，即下丘脑-垂体-卵巢轴的调节失常发生在哪一环节，然后再确定是何种疾病所引起。必须注意除外妊娠引起的生理性闭经。应详细询问病史、体查和盆腔检查，然后依次逐步进行下列诊断性检查：
1．孕激素试验是评估内源性雌激素水平的简单、快速方法。
黄体酮每日肌肉注射lomg，连续5天；或口服安宫黄体酮，每日l0～20mg，连用5天。如在停药后3～7日出现撤药出血为阳性反应，提示子宫内膜已受一定水平的雌激素影响，呈增殖期变化，外源性孕激素使其在增殖期变化的基础上发生分泌期变化，停药后内膜剥脱而出血。若孕激素试验无撤药出血称阴性反应，说明患者体内雌激素水平低下，以致对孕激素无反应，应进一步作雌激素试验。
2．雌激素试验
患者每晚睡前口服己烯雌酚2mg，连续20～22日或用苯甲酸雌二醇，隔日肌注2mg，共10次，为使停药后子宫内膜脱落完全，最后5日加用安宫黄体酮，每日口服10mg，停药后3～7日发生撤药出血为雌激素试验阳性，提示子宫内膜功能正常，对雌激素有反应，闭经是由于患者体内雌激素水平低落所致，应进一步寻找原因。无撤药出血为试验阴性，则应重复一次雌激素试验，若仍无出血，提示子宫内膜有缺陷或被破坏，可诊断为子宫性闭经。
