精子细胞毒试验

抗精子抗体与精子结合后，在补体参与下，可导致精子制动和死亡，利用台盼蓝或伊红y等染料使死精子染色，间接验证血清或分泌液中是否有制动精子的抗体存在。

（一）台盼蓝染色法

【准备】

（1）待检血清的分离和灭活补体。

（2）ab血型人血清（补体）制备。

（3）2%台盼蓝液配制（用蒸馏水）。

（4）台盼蓝-生理盐水溶液配制：取适量生理盐水，加等体积2%台盼蓝水溶液，混匀即可。

（5）配制0.01mol/l，ph7.4pbs溶液。

【方法】

（1）取正常新鲜精液［精子浓度为（40～100）×106/ml］用ph7.4pbs作1∶10稀释，以500r/min30min离心洗涤一次，弃去上清，沉渣用pbs调整精子浓度为100×106/ml的精子悬液。

（2）在小试管内加入1滴待检血清，1滴精子悬液和2滴补体血清。置37℃孵育，并于30min、60min分别追加2滴补体血清，直至90min后加入1滴台盼蓝生理盐水溶液，继续孵育60min，取出小试管，以500r/min，30min离心，弃去上清，将沉渣涂片，待干燥后镜下观察。以阴性血清作对照组，以同样条件和方法处理。